前言

克百威是高效而廣譜的殺蟲農(nóng)藥，進(jìn)入環(huán)境后，在環(huán)境中殘留時(shí)間長(zhǎng)，在土壤中的半衰期為30~120d，其中沙土中為30d，肥沃土壤中40d，泥中為80d，由于其在水中溶解性較強(qiáng)，可隨水體流動(dòng)而造成污染擴(kuò)散。該農(nóng)藥對(duì)鳥類毒性非常強(qiáng)，長(zhǎng)期大面積使用會(huì)對(duì)濕地鳥類造成嚴(yán)重威脅。人體接觸被污染的環(huán)境或食用被污染的食品和水源會(huì)導(dǎo)致慢性中毒。

本文參照《蜂產(chǎn)品中克百威殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（征求意見稿）》，利用EZsep™QuEChERS（6gMgSO4、1.5gNaCl， 貨號(hào)：PZ13059）和EZsep™QuEChERS（50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4， 貨號(hào)：PZ13005）凈化樣品，再通過高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)進(jìn)行檢測(cè)，建立了一種對(duì)蜂產(chǎn)品中克百威殘留量的分析方法。

1、       實(shí)驗(yàn)過程

1.1 儀器與試劑

EZsep™QuEChERS（50mgPSA、50mg C18、150mgMgSO4，貨號(hào)：PZ13005），北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；

EZsep™QuEChERS（6gMgSO4、1.5 gNaCl，貨號(hào)：PZ13059），北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；

4500質(zhì)譜系統(tǒng)，SCIEX公司；
EZsep™ MAX固相萃取柱（60 mg/3mL，貨號(hào)：PZ12802），北京萊伯帕茲?rùn)z測(cè)科技有限公司；

冷凍離心機(jī)，GL-20G-Ⅱ，上海安亭科學(xué)儀器廠；

乙腈（色譜純），購(gòu)自賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；

甲酸、乙酸、乙酸胺、氯化鈉、無(wú)水硫酸鎂等化學(xué)品均為分析純或以上，購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；

1.2 工作液配制

51種農(nóng)藥混標(biāo)：10μg/mL，溶劑為乙腈，購(gòu)自壇墨質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心。
51種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)使用液：移取51種農(nóng)藥混標(biāo)0.1mL，用乙腈稀釋至10mL容量瓶中，配制成濃度為100ng/mL的51種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)使液。依次移取100ng/mL的51種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)使用液0.01、0.02、0.05、0.1、0.2mL，分別置于10mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，得到濃度依次為0.1μg/L、0.2μg/L、0.5μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列工作液。
1.3 實(shí)驗(yàn)部分

1.3.1 樣品制備

取蜂蜜試樣2g，置于50mL聚丙烯離心管中，加入10mL水、渦旋30s混勻后靜置10 min，加入5mL1%乙酸乙腈溶液，渦旋提取3min，加入EZsep™QuEChERS（6gMgSO4、1.5gNaCl，貨號(hào)：PZ13059） 后立即手動(dòng)劇烈振搖1min，隨后以5000r/min離心5min，取上清液1.0mL待凈化。

1.3.2 固相萃取凈化取

1.3.1待凈化液于裝有EZsep™ QuEChERS（50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4，貨號(hào)：PZ13005）的2mL離心管中，渦旋混勻30s后以5000r/min離心5min,吸取上清液0.5mL與0.5mL水渦旋混勻，經(jīng)0.22um濾膜過濾至進(jìn)樣小瓶，供LC-MS/MS測(cè)定。1.3.1 LC-MS/MS儀器條件色譜柱：Shim-pack Velox C18（2.7μm，2.1*100mm）；柱溫：40℃；檢測(cè)方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）；流動(dòng)相：A：0.1%甲酸-5mmol/L乙酸銨水溶液；B：乙腈；流速：0.4mL/min；進(jìn)樣量：2μL。

表1 流動(dòng)相梯度洗脫表

2、       實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 加標(biāo)回收率

圖1 標(biāo)液色譜圖

圖2克百威標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

圖2 3-羥基克百威標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

3、       實(shí)驗(yàn)結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)使用EZsep™QuEChERS（6gMgSO4、1.5gNaCl，貨號(hào)：PZ13059）和EZsep™QuEChERS（50mgPSA、50mgC18、150mg MgSO4，貨號(hào)：PZ13005）對(duì)蜂產(chǎn)品中克百威進(jìn)行凈化，再通過高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜進(jìn)行測(cè)定，該方法的加標(biāo)回收率在94.2%~102.8%之間，RSD為1.4%~ 3.2%，滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。測(cè)試結(jié)果說明EZsep™QuEChERS產(chǎn)品能很好的完成方法中的凈化工作，并且結(jié)果穩(wěn)定、可靠。

4、       參考文獻(xiàn)

[1] 《蜂產(chǎn)品中克百威殘留量的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法 （征求意見稿）》